O mercado de insumos de microbiologia tem experimentado um crescimento significativo nos últimos anos, impulsionado pelo avanço da pesquisa científica, pela demanda por diagnósticos precisos e pelo desenvolvimento de novas tecnologias na área da saúde. Esses insumos, que incluem meios de cultura, reagentes, enzimas e kits de detecção, são essenciais para estudos microbiológicos, diagnósticos clínicos, controle de qualidade nos diversos tipos de indústria, como a alimentícia, o agronegócio e a farmacêutica.

Fatores de Crescimento

Um dos principais motivos para o crescimento desse mercado é o aumento da incidência de doenças infecciosas, que exige métodos rápidos e precisos para a identificação de patógenos. A pandemia de COVID-19, por exemplo, destacou a importância de insumos de alta qualidade para o desenvolvimento de testes diagnósticos e vacinas. A maior conscientização sobre segurança alimentar e a necessidade de monitoramento microbiológico em produtos industrializados também têm expandido a demanda por esses produtos.

No contexto latino-americano, o Brasil destaca-se como o segundo maior consumidor de insumos de microbiologia, ficando atrás apenas do México. Essa posição é sustentada por setores estratégicos como agronegócio, indústrias alimentícia e cosmética, laboratórios clínicos e de pesquisa. A elevada qualidade exigida nesses produtos é um reflexo da atuação do país como um dos principais exportadores de commodities e produtos industrializados, especialmente no agronegócio, onde a microbiologia é crucial para o controle de qualidade e a segurança alimentar.

Na indústria alimentícia e de bebidas, culturas microbianas desempenham papel fundamental em processos de fermentação, desenvolvimento de sabores e preservação de alimentos. O aumento na demanda por probióticos e alimentos funcionais também tem fomentado inovações nessa área. Já no setor de cosméticos, normas mais rigorosas da ANVISA exigem controle microbiológico rigoroso, promovendo o uso de insumos especializados e tecnologias avançadas para análises e testes.

Por fim, o país possui uma robusta rede de laboratórios clínicos e de pesquisa que demanda insumos microbiológicos para diagnósticos, estudos científicos e desenvolvimento de novos medicamentos, consolidando sua posição como um ator estratégico no mercado da América Latina.

Tendências Tecnológicas

A automação e a digitalização estão reformulando o mercado de insumos de microbiologia. Tecnologias como PCR (Reação em Cadeia da Polimerase), sequenciamento genômico e análises com inteligência artificial vêm sendo integradas aos processos microbiológicos, otimizando diagnósticos e reduzindo custos. Paralelamente, iniciativas voltadas à sustentabilidade, como o uso de meios de cultura livres de componentes animais e reagentes menos tóxicos, têm ganhado destaque, refletindo a preocupação ambiental do setor.

Em 2025, para as empresas se manterem competitivas precisarão investir em tecnologia, sustentabilidade e qualificação profissional

Desafios do Mercado

Com um cenário global de transformações tecnológicas e socioeconômicas, o mercado enfrenta desafios significativos, como a resistência antimicrobiana, alterações regulatórias e a integração de novas tecnologias. O déficit de mão de obra qualificada é um entrave crítico que pode limitar tanto o crescimento quanto a eficácia das iniciativas no setor.

Além disso, fatores macroeconômicos como taxas de juros elevadas, volatilidade cambial e pressões por sustentabilidade podem dificultar o equilíbrio entre custo e inovação, especialmente em segmentos como o agronegócio, que têm aumentado sua relevância ao integrar microrganismos no fortalecimento do solo e na melhoria da produtividade agrícola.

Oportunidades para 2025

As oportunidades para o mercado de microbiologia em 2025 incluem avanços nos diagnósticos rápidos e precisos, capazes de viabilizar intervenções terapêuticas ágeis, cruciais no combate à crescente resistência antimicrobiana, tema que foi destaque no G-20 em 2024, também promete ser um diferencial importante com o desenvolvimento de soluções que auxiliem o enfrentamento da resistência antimicrobiana.

O estudo de microrganismos emergentes também deve ganhar relevância, impulsionado por fatores como mudanças climáticas e aquecimento global. Essa perspectiva está alinhada ao conceito de One Health, que reconhece a interconexão entre a saúde humana, animal e ambiental, destacando o papel central da microbiologia na garantia dessa sustentabilidade integrada.

Esse cenário permite observar que o mercado de insumos de microbiologia irá manter o seu crescimento, movido por demandas globais de saúde, avanços tecnológicos e a necessidade de inovação. Em 2025, o setor apresentará oportunidades crescentes nos segmentos agro, industrial e clínico. Assim, para as empresas se manterem competitivas precisarão investir em tecnologia, sustentabilidade e qualificação profissional, enquanto enfrentam os desafios de um cenário econômico e ambiental em constante transformação.

O conceito de valor inclui uma propriedade nominal ou um atributo qualitativo, como identidade ou sequência. As incertezas para tais atributos podem ser expressas como probabilidades ou níveis de confiança.

O MRC contribui decisivamente para o aumento da confiança dos resultados das medições, com objetivo de prover rastreabilidade aos laboratórios para calibrar instrumentos, atribuir valor de propriedade a outros materiais, validar métodos de medição e garantir a qualidade de processos fundamentais para assegurar a confiabilidade metrológica.

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·     Candida albicans_ derived from ATCC® 10231™

·     Escherichia coli_ derived from ATCC® 8739™

·     Pseudomonas paraeruginosa_ derived from ATCC® 9027™

·     Salmonella enterica_ subsp. enterica serovar _Typhimurium_ derived from ATCC® 14028™

·     Staphylococcus aureus_ subsp. _aureus_ derived from ATCC® 25923™

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Estudos e Pesquisas de Destaque

A seguir, compartilhamos conteúdos relevantes com estudos utilizando novas drogas de antibióticos conjugados.

• https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34060895/
• https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34439062/
• https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35760303/
• https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1413867022000897?via%3Dihub
• https://www.bjid.org.br/en-avaliacao-da-atividade-de-imipenemrelebactam-articulo-S1413867020301860
• https://www.bjid.org.br/en-atividade-de-imipenem-relebactam-e-comparadores-articulo-S1413867022001179
• https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30712199/
• https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29158270/
• https://lume.ufrgs.br/handle/10183/271557

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A Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA) estabeleceu os critérios diagnósticos e os indicadores nacionais adotados no sistema de monitoramento de infecções relacionadas à saúde. Esses protocolos devem ser amplamente discutidos entre o Serviço de Controle de Infecção, as equipes de enfermagem e o laboratório de microbiologia.  

O Laboratório de Microbiologia clínica possui a responsabilidade de realizar a cultura e liberar os resultados o mais rápido possível para ações de segurança à infecção relacionadas à saúde do paciente. 

*Controle de Surtos; 
*Isolamento do paciente (Cuidados de proliferação); 
*Notificação para CCIH (Notificação para ANVISA); 

Decisões sobre populações alvo para realização de cultura de vigilância, bem como locais para realização devem ser realizadas em dados de epidemiologia local considerando a incidência e prevalência de MDR, a situação endêmica ou epidêmica, seja em uma unidade de internação específica ou no hospital como um todo.  

Embora a transmissão de microrganismos multirresistentes (MDR) seja reportada com maior frequência em unidades críticas, de cuidados intensivos, todos os serviços de saúde são afetados pela seleção e disseminação de MDR.

Os resultados podem sinalizar também: 

• Tempo de internação 
• Custos de tratamento 
• Taxas de morbidade e mortalidade 
•  Práticas inadequadas de controle de infecção. 

As bactérias, assim como outros microrganismos, possuem alta capacidade de sofrer mutações e adquirir genes de resistência, tornando-se resistentes aos antimicrobianos. O amplo uso de antimicrobianos provoca pressão seletiva de modo que as cepas mais resistentes persistem, propagam- se e acumulam mecanismos de resistência 

Uma vez detectado um microrganismo multirresistente a comunicação deverá ser realizada imediatamente aos responsáveis pela tomada de decisão no âmbito do serviço de saúde, em geral ao profissional assistente e à Comissão de Controle de Infecção Hospitalar (CCIH) que deverá adotar as medidas de prevenção e controle e às Coordenações de Controle de Infecção Hospitalar do Estado (CECIH), Município (CMCIH), Distrito Federal e à Anvisa. 

MRSA: Staphylococcus aureus resistentes à meticilina 
O Staphylococcus aureus MRSA possui genes mecA e mecC e possuem  resistência aos antibióticos betalactâmicos, exceto a nova classe de cefalosporinas que têm atividade anti-MRSA (ceftarolina e ceftobiprole), principalmente swab nasal e axilar para detecção de colonização por microrganismos resistentes a meticiclina, entretanto outras amostras, como vias respiratórias, perianal, retal, pele e feridas operatórias, também podem ser usadas como objeto de investigação. 

Exemplos de cepas controle para detecção de MRSA:  
S. aureus ATCC 29213 Sensível à meticilina  
S. aureus NCTC 12493 Resistente à meticilina (mecA)  
S. aureus NCTC 13552 Resistente à meticilina (mecC).

Referências Bibliográficas

• Bernardo Gabriel de Oliveira, Carlos Augusto Albini, Gislene M. Diógenes Botão, Helena Homem de Mello de Souza. “A Identificação Direta Pelos Meios Cromogênicos é Confiável a Ponto de Dispensar as Provas Bioquímicas?” Curso de especialização em Microbiologia PUC – PR, Professor e Mestre Universidade Federal do Paraná, Hospital de Clínicas, Curitiba – PR, Hospital de Clínicas, Curitiba – PR.
  
  
• – Medicina Laboratorial • J. Bras. Patol. Med. Lab. 45 (1) • Fev 2009 • https://doi.org/10.1590/S1676-24442009000100005 “Diagnóstico de infecção por Candida: avaliação de testes de identificação de espécies e caracterização do perfil de suscetibilidade” https://doi.org/10.1590/S1676-24442009000100005
  
• Luciene Almeida. “Meios de Cultura Cromogênicos.” Escrito por Luciene Almeida em 24 de fevereiro de 2021.
  
  
• GRANJA, Brunna de Mattos. “Avaliação de meios de cultura cromogênicos para identificação rápida de microrganismos causadores de mastite bovina” [doi:10.11606/D.10.2020.tde-19012021-100518]. Pirassununga: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, 2020. Dissertação de Mestrado em Nutrição e Produção Animal. [Acesso em 2023-07-20].

20% das cepas isoladas de  E.coli  - o patógeno mais comum nas infecções do trato urinário – estão resistentes aos medicamentos de primeira e segunda linha, quanto aos tratamentos de segunda linha (fluoroquinolonas), com isso precisamos de resultados rápidos, precisos e eficazes. 

Urocultura:  Exame solicitado no Laboratório de Microbiologia Clínica que detecta o agente etiológico causador da infecção, e que após a identificação do microrganismo permitirá o teste de sensibilidade (antibiograma) para a terapêutica. 

A Escherichia coli é responsável por 72% a 85% das infecções do trato urinário adquiridas na comunidade e por 48% a 60% em pacientes idosos admitidos em instituições,  quando a ITU é adquirida no hospital, em paciente internado os agentes etiológicos variam desde a Escherichia coli, outras Enterobacteriales, Enterococcus faecalis, Staphylococcus saprophyticus,  fungos, com destaque para Candida spp, dentre outros.  

Meio Orientation
Permite a identificação presuntiva de diversos microrganismos: 
Escherichia coli – Colônias rosa escura a vermelhas 
Klebsiella, Citrobacter, Serratia spp – Colônias azul metálicas, podendo apresentar halo avermelhado ao redor 
Proteus,Providencia, Morganella spp. – Colônias beges com halo marrom 
Acinetobacter spp. – Colônias beges 
Pseudomonas spp. – Colônias transparentes ou com sua pigmentação natural esverdeada 
Staphylococcus epidermidis – Colônias pequenas creme esbranquiçadas 
Staphylococcus aureus – Colônias pequenas e amarelas 
Staphylococcus saprophyticus – Colônias pequenas cor de rosa 
Enterococcus spp. – Colônias pequenas e azul turquesa Candida spp. – Colônias brancas puntiformes

Referências Bibliográficas

• Bernardo Gabriel de Oliveira, Carlos Augusto Albini, Gislene M. Diógenes Botão, Helena Homem de Mello de Souza. “A Identificação Direta Pelos Meios Cromogênicos é Confiável a Ponto de Dispensar as Provas Bioquímicas?” Curso de especialização em Microbiologia PUC – PR, Professor e Mestre Universidade Federal do Paraná, Hospital de Clínicas, Curitiba – PR, Hospital de Clínicas, Curitiba – PR.
  
  
• – Medicina Laboratorial • J. Bras. Patol. Med. Lab. 45 (1) • Fev 2009 • https://doi.org/10.1590/S1676-24442009000100005 “Diagnóstico de infecção por Candida: avaliação de testes de identificação de espécies e caracterização do perfil de suscetibilidade” https://doi.org/10.1590/S1676-24442009000100005
  
• Luciene Almeida. “Meios de Cultura Cromogênicos.” Escrito por Luciene Almeida em 24 de fevereiro de 2021.
  
  
• GRANJA, Brunna de Mattos. “Avaliação de meios de cultura cromogênicos para identificação rápida de microrganismos causadores de mastite bovina” [doi:10.11606/D.10.2020.tde-19012021-100518]. Pirassununga: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, 2020. Dissertação de Mestrado em Nutrição e Produção Animal. [Acesso em 2023-07-20].

A sobrevivência de bactérias anaeróbias depende de sua sensibilidade ao oxigênio, requisitos nutricionais, coleta apropriada, meio de cultura, tempo e temperatura de incubação. Podem causar infecções graves, apresentando altas taxas de morbidade e mortalidade.

Bactérias Anaeróbias

Capazes de sobreviver e multiplicar-se na ausência de oxigênio. 

A definição de anaeróbio “stricto” (estrito) , se baseia na quantidade de oxigênio que tolera, na exigência de uma tensão de oxigênio reduzida e na ausência de crescimento em superfície de um meio de cultura sólido sob uma atmosfera de 10% de CO₂ (18% de O₂).

O oxigênio é letal ao anaeróbio estrito porque na sua redução são formadas substâncias intermediárias tóxicas (radical hidroxila/ânion superóxido/peróxido de hidrogênio) que são removidas, eventualmente, por enzimas da família dos superóxidos dismutase e peroxidase, presentes em quantidades variáveis em algumas espécies, que assim garantem certa tolerância ao O₂.

Os anaeróbios exigem, além da exclusão do O₂, um ambiente com potencial de óxido-redução (Eh) baixo que pode também variar em função do pH estabelecido. 

É importante salientar que esse grupo de bactérias é formado por espécies que variam de aerotolerantes a muito exigentes, quanto à ausência de oxigênio.

Infecção

As infecções por anaeróbios são causadas, principalmente por:   

. Origem Endógena

Bacteroides fragilis, Bacteroides thetaiotaomicron, Parabacteroides distasonis,   Peptostreptococcus spp, bacilos Gram negativos pigmentados (Prevotella spp e Porphyromonas spp.) e Fusobacterium spp. 

. Origem Exógena

Clostridioides botulinum. Clostridioides perfringens, Clostridioides tetani. 

Características das infecções prováveis por Anaeróbios

– Sítio anatômico da infecção localizado próximo à superfície da boca (local de      colonização bacteriana); 
– Surgimento de infecções após mordida de animais; 
– Infecção associada a tumores; 
– Odor fétido; 
– Presença de gás no local da infecção; 
– Presença de grânulos de enxofre no material clínico (característica de uma infecção por Actinomyces); 
– Presença de bactérias no Gram (bacilos Gram-positivos esporulados que lembram Clostridium), bactérias no material clínico corado pela coloração de Gram, que não crescem nos meios de cultura mantidos em atmosferas de aerobiose;
– Crescimento de bactérias somente na parte inferior de tubos com meios de cultura em caldo Tioglicolato com resazurina; 
– Ausência de resposta à terapia antimicrobiana, caso esteja sem cobertura para anaeróbios.

Coleta 

A coleta adequada de materiais clínicos para a pesquisa de bactérias anaeróbias é fundamental para um diagnóstico preciso.

Transporte 

Deve ser feito de acordo com o tipo de amostra, utilizando meios de cultura apropriados e mantendo a temperatura adequada.

O tempo de transporte depende do material e do volume da amostra.

– Material purulento (> 3mL), manter o tubo vedado (viabilidade por 2-3 horas); 
– Tubos gaseificados (mistura de N₂, H₂ e CO₂ ou CO₂ apenas);  
– Meios de transporte semi-sólidos contendo agentes redutores, como a cisteína, dispostos em camada alta (Cary-Blair pré-reduzido) – Agência Nacional de Vigilância Sanitária – Anvisa;
– Meio de cultura Tioglicolato meio semi sólido pré reduzido.

Importante: 
– Não utilizar seringa, pelo risco ocupacional que representa. 
– A amostra deve ser mantida entre 18 e 22ºC durante o transporte (2h). 
– Não refrigerar (pois pode aumentar a difusão do O₂, ocasionando perda de algumas bactérias anaeróbias). 

Observação: Transportar em posição vertical, em temperatura ambiente (estabilidade de 24h).

Observação: O frasco não pode ser refrigerado. 

Processamento da Cultura de Anaeróbios

– Deve ser realizado preferencialmente, em câmara anaeróbica, apropriada para laboratórios que processam grandes quantidades de cultura de anaeróbios;
 – Semeados em ágar anaeróbio (materiais clínicos suspeitos) para melhor recuperação;
– O tempo de realização do preparo até a semeadura deve ser realizado em até 20 minutos. 

Ágar Anaeróbio 
Meio de cultura seletivo para anaeróbios (a maior parte das infecções provocadas pelos anaeróbios estritos são infecções mistas), o uso de meios de cultura seletivos auxilia no isolamento bacteriano. 

Atmosfera de Anaerobiose em Laboratório Clínico

As jarras de anaerobiose com geradores químicos permitem obter uma atmosfera adequada para a multiplicação dessas bactérias. Os mais utilizados são os que provocam o consumo do oxigênio através da reação deste com o H₂, gerado pela presença de um haleto, formando água. A atmosfera da jarra é substituída por CO₂, gerado pela presença de bicarbonato. Utiliza-se um controle (fita de papel de filtro impregnada de azul de metileno, que é um indicador de anaerobiose).  

Teste de Sensibilidade

Seguir as recomendações do BrCast/Eucast (brcast.org.br) 

– Utilizar o Meio de Cultura Ágar Anaeróbio Fastidioso com 5% de Sangue de Cavalo (FAA-HB). 

O Meio de Cultura FAA-HB é o recomendado para disco-difusão dos anaeróbios (BrCast/Eucast). 

– Microrganismos Referência para o teste de Sensibilidade: 

Bacteroides fragilis ATCC 25285                       
Clostridium perfringens ATCC 13124

O BrCast/Eucast estabeleceu um método para avaliar o ambiente anaeróbico para o teste de suscetibilidade antimicrobiana (AST) de bactérias anaeróbias em ágar anaeróbio fastidioso com 5% de sangue de cavalo desfibrinado mecanicamente (FAA-HB).  

O método utiliza a associação entre a diminuição do diâmetro da zona do disco do metronidazol e o aumento dos níveis de oxigênio com um microrganismo referência aerotolerante de Clostridium perfringens DSM 25589 (CCUG 75076 e NCTC 14679). 

O microrganismo referência C. perfringens foi testado em FAA-HB com inóculo McFarland 1 e disco de metronidazol 5 μg. FAA-HB foi incubado por 16-20 h a 35-37°C.

Foi determinada a associação entre os níveis de oxigênio (0, 0,16, 1, 2 e 4% de oxigênio) e o diâmetro da zona do metronidazol.

A reprodutibilidade a 0% de oxigênio foi investigada como parte de um estudo multicêntrico europeu de difusão em disco de bactérias anaeróbias. Os diâmetros médios da zona (n = 12) em cada nível de oxigênio foram 29mm (0%), 21 mm (0,16%), 16 mm (1%), 15 mm (2%) e 15 mm (4%). Os diâmetros da zona do metronidazol a 0% de oxigênio do estudo de reprodutibilidade multicêntrico tiveram uma mediana de 29 mm e uma faixa de percentil de 95% de 25-33 mm (n=236). Apenas uma leitura foi inferior a 25 mm. Com base nos resultados, um diâmetro de zona de ≥25 mm usando um disco de metronidazol de 5 μg e o microrganismo C. perfringens, testado com as recomendações do EUCAST, pode ser usado para indicar que o ambiente anaeróbio é de qualidade suficiente para cultura e difusão em disco AST. 

O EUCAST incluiu o método como parte do Controle de Qualidade para AST de bactérias anaeróbias. 

• Como fazer o controle do ambiente anaeróbio? (BrCast/Eucast):  

Microrganismo Referência:
Clostridium perfringens NCTC 14679 (DSM 25589) 

Agente antimicrobiano: Metronidazol (5 µI) 
Intervalo >/= 25 mm.
OBS:  Halo >25 mm indica um ambiente de anaerobiose insuficiente. 

A Plastlabor está atenta à atualização dos documentos vigentes para melhor atender aos seus clientes.       

Referências Bibliográficas

– EUCAST (European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing). Consultation on MIC breakpoints for additional antimicrobial agents on anaerobic bacteria (Bacteroides spp., Prevotella spp., Fusobacterium necrophorum, Clostridium perfringens, and Cutibacterium acne). Disponível em: https://www.eucast.org.

– BrCast (Brazilian Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing). Tabelas de pontos de corte para interpretação de CIMs (Concentrações Inibitórias Mínimas) e diâmetros de halos. Disponível em: https://brcast.org.br.

– Oplustil, C. P., Zoccoli, C. M., Tobouti, N. R., & Scheffer, M. C. (Eds.). Procedimentos Básicos em Microbiologia Clínica (4ª ed.). Editora Sarvier.

Os meios cromogênicos são diferenciais e seletivos, permitindo a identificação presuntiva do patógeno em menor tempo.

Vantagens

• Sensibilidade aumentada: microrganismo cresce independente da microbiota;  
• Seletividade maior: microrganismo alvo detectado mais facilmente; 
• Custo reduzido: Utiliza-se somente um meio, eliminando a necessidade de utilização de mais de um meio e subculturas; 
• Menos mão de obra: Profissionais com menor tempo de semeadura e leitura; 
• Fácil identificação:  colônias-alvo de microrganismos específicos podem ser reconhecidas rapidamente; 
• Alertas de AMR e os relatórios para CCIH em menor tempo. 

Como funciona?  
Os meios cromogênicos contêm moléculas incolores solúveis chamadas cromogênicos. Os cromogênicos são compostos de duas partes: um substrato (que é o alvo da atividade enzimática específica do microrganismo) e um cromóforo. Quando a ligação entre o substrato e o cromóforo é quebrada por uma enzima específica produzida pelo microrganismo alvo, o cromóforo é liberado. Em sua forma não conjugada, o cromóforo apresenta cores distintas. Devido à solubilidade reduzida, o cromóforo forma um precipitado que confere uma cor única à colônia.  

Referências Bibliográficas

• Bernardo Gabriel de Oliveira, Carlos Augusto Albini, Gislene M. Diógenes Botão, Helena Homem de Mello de Souza. “A Identificação Direta Pelos Meios Cromogênicos é Confiável a Ponto de Dispensar as Provas Bioquímicas?” Curso de especialização em Microbiologia PUC – PR, Professor e Mestre Universidade Federal do Paraná, Hospital de Clínicas, Curitiba – PR, Hospital de Clínicas, Curitiba – PR.
  
  
• – Medicina Laboratorial • J. Bras. Patol. Med. Lab. 45 (1) • Fev 2009 • https://doi.org/10.1590/S1676-24442009000100005 “Diagnóstico de infecção por Candida: avaliação de testes de identificação de espécies e caracterização do perfil de suscetibilidade” https://doi.org/10.1590/S1676-24442009000100005
  
• Luciene Almeida. “Meios de Cultura Cromogênicos.” Escrito por Luciene Almeida em 24 de fevereiro de 2021.
  
  
• GRANJA, Brunna de Mattos. “Avaliação de meios de cultura cromogênicos para identificação rápida de microrganismos causadores de mastite bovina” [doi:10.11606/D.10.2020.tde-19012021-100518]. Pirassununga: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, 2020. Dissertação de Mestrado em Nutrição e Produção Animal. [Acesso em 2023-07-20].

Bactérias Gram positivas, colônias puntiformes, translúcidas, com beta-hemólise, catalase negativa, CAMP negativo, PYR positivo e sensíveis a baixas concentrações de bacitracina.

Elas podem causar infecções como faringite, amigdalite, impetigo, erisipela, febre reumática, fasciite necrosante e Síndrome do choque tóxico.^.

A pele é uma região bastante exposta, que sofre frequentemente riscos de infecção, e possui microbiota saprófita.

Os microrganismos podem penetrar no corpo humano por ruptura da integridade da pele e mucosa de forma:
– Exógenas: traumas ou mordeduras
– Endógenas: complicações pós cirúrgica ou implantes
– Hematogênica: Sistema vascular.

As infecções de pele e tecidos moles podem ser:
– Primárias: não existe porta de entrada (Celulite, impetigo, foliculite, furunculose e erisipela).
– Secundárias: por extensões de lesões já existentes (úlceras, feridas cirúrgicas ou traumáticas).

Identificação
A identificação de espécie de estreptococos beta hemolíticos é feita através de aglutinação com soros específicos contra os antígenos de Lancefield (A, B, C, D, F e G).

• Ágar Sangue 

O Ágar Sangue é um meio nutritivo (em conformidade com os requisitos harmonizados USP/EP/JP) e não seletivo, que oferece ótimas condições de crescimento à maioria dos microrganismos Gram positivos, Gram negativos, leveduras e bactérias fastidiosas. 

A combinação de caseína e peptona de soja atuam como fonte de nitrogênio, aminoácidos e peptídeos de cadeia longa; o cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico e o ágar solidifica o meio. 

A suplementação com 5% de sangue de carneiro fornece fatores adicionais para o crescimento de microrganismos exigentes e auxilia na determinação de reações hemolíticas (beta, alfa, gama), as quais são essenciais para a diferenciação do gênero Streptococcus. 

Os padrões das reações hemolíticas podem variar de acordo com a fonte do sangue e o tipo de meio base utilizado. Em geral, bases de Ágar Sangue são relativamente livres de açúcares redutores, os quais têm sido reportados como uma influência negativa nas reações hemolíticas de Streptococcus β-hemolíticos. 

Utilizado também para provas manuais de identificação presuntivas: Satelitismo, CAMP, Disco de Optoquina.  

Referências bibliográficas:

– Aída Mª Gutiérrez Sáncheza, Myriam López Rojo, Carmelo Guerrero Laleona, Matilde Bustillo Alonso, Rev Pediatra Aten Primaria vol.22 no.85 Madrid Jan./Mar. 2020 EPub 03-Ago-2020 Disponível em: Síndrome de shock tóxico estreptocócico (isciii.es). Acesso em 19 de jun de 2023.

– Carmen Paz Oplustil, Cássia Zoccoli, Nina Reiko Tobouti e Mara Cristina Scheffer. Procedimentos Básicos em Microbiologia Clínica – 4° edição – Editora Sarvier .

– Agência Nacional de Vigilância Sanitária | Anvisa, MICROBIOLOGIA CLÍNICA PARA O CONTROLE DE INFECÇÃO RELACIONADA À ASSISTÊNCIA À SAÚDE, Módulo 4: Procedimentos Laboratoriais: da Requisição do Exame à Análise Microbiológica e Laudo Final. Disponível em: modulo-4-procedimentos-laboratoriais-da-requisicao-do-exame-a-analise-microbiologica-e-laudo-final (www.gov.br). Acesso em 19 de jun de 2023.

Todos os alimentos destinados ao consumo requerem a aplicação de boas práticas de fabricação, desde a produção primária até o consumidor final. Agricultores, fabricantes, processadores, manipuladores de alimentos e consumidores têm a responsabilidade de garantir a segurança e a adequação dos alimentos para consumo.

Princípios gerais estabelecem uma base sólida para assegurar a higiene dos alimentos e, quando apropriado, devem ser utilizados em conjunto com códigos de práticas de higiene específicos e diretrizes sobre critérios microbiológicos.
  

Surtos de doenças transmitidas por alimentos podem prejudicar o comércio e o turismo, acarretando perdas econômicas, desemprego e conflitos. Alimentos deteriorados resultam em desperdício e aumento de custos, afetando negativamente o comércio e a confiança do consumidor.  O comércio internacional de alimentos e as viagens internacionais estão em crescimento, trazendo benefícios socioeconômicos, mas também a disseminação de doenças ao redor do mundo.  

Nas últimas duas décadas, os hábitos alimentares têm passado por mudanças em muitos países, o que levou ao desenvolvimento de novas técnicas de produção, preparação e distribuição de alimentos. Portanto, um controle eficaz de higiene tornou-se essencial para evitar consequências prejudiciais decorrentes de doenças e danos à saúde humana e à economia.

Listeriose 
A listeriose é uma doença relativamente rara, com 0,1 a 10 casos por 1 milhão de pessoas por ano, variando de acordo com os países e regiões do mundo.  

Embora o número de casos de listeriose seja pequeno, a alta taxa de mortalidade associada a essa infecção a torna um importante problema de saúde pública. Surtos anteriores envolveram alimentos como produtos à base de carne prontos para consumo, como salsichas, patês, salmão defumado e salsichas de carne crua fermentada, bem como produtos lácteos (incluindo queijos macios, leite não pasteurizado e sorvete) e saladas preparadas (como salada de repolho e broto de feijão), além de frutas e legumes frescos.

Listeria  
As bactérias do gênero Listeria são bacilos Gram-positivos, aeróbios e anaeróbios facultativos, que possuem mobilidade característica (móveis a 25°C em forma de guarda-chuva, mas não a 37°C). Elas não são resistentes a ácidos, não são encapsuladas, não formam esporos e são beta-hemolíticas, além de resistirem a temperaturas baixas. Essas bactérias estão presentes no meio ambiente, no intestino de mamíferos não humanos e humanos, em pássaros e crustáceos. 

Entre as diversas espécies, a Listeria monocytogenes é o principal patógeno nos seres humanos. 

Praticamente todos os tipos de alimentos podem hospedar e transmitir a L. monocytogenes, mas a infecção ocorre normalmente pela ingestão de laticínios, vegetais crus, carnes contaminadas ou, especialmente, alimentos refrigerados que não precisam ser cozidos antes de consumidos. 

Os desafios para o controle de L. monocytogenes são significativos devido à sua presença generalizada, alta resistência a métodos conservantes comuns, como sal, fumaça ou condições ácidas nos alimentos, e sua capacidade de sobreviver e crescer em temperaturas de refrigeração (cerca de 5°C).

Existem diretrizes que estabelecem a aplicação de princípios gerais de higiene alimentar para o controle de Listeria monocytogenes em alimentos prontos para consumo (CXG 61-2007), além das Boas Práticas de Higiene (BPH) e Boas Práticas de Fabricação (BPF). Também é recomendado implementar um sistema de gestão da segurança alimentar baseado nos princípios da Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle (APPCC).

Cepa ATCC 13932 – Listeria monocytogenes

Uma ferramenta importante para o controle de Listeria monocytogenes é o Ágar Cromogênico Listeria, de acordo com a formulação de Ottaviani e Agosti (ALOA). Esse meio seletivo foi desenvolvido para isolar e identificar presuntivamente a Listeria monocytogenes de outras espécies de Listeria em amostras alimentares, seguindo a norma ISO 11290-1 de 2014. 

É essencial distinguir rapidamente esse patógeno de outras espécies não patogênicas de Listeria. A diferenciação entre as espécies de Listeria ocorre com base na atividade da enzima β-glucosidase, enquanto a Listeria monocytogenes é diferenciada com base em sua atividade enzimática de fosfolipase. O cloreto de lítio e outros componentes antimicrobianos, como ceftazidima, polimixina, ácido nalidíxico e ciclohexmida presentes na fórmula, são responsáveis pela seletividade do meio.

Referências Bibliográficas :

• CAC/GL 61 (2007)- Guidelines on the Application of General Principles of Food Hygiene to the Control of Listeria Monocytogenes in Foods – Disponível em: untitled (nicd.ac.za) . Acesso em: 16 jun 2023.

• ISO 11290-2:2017(en) Microbiology of the food chain — Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes and of Listeria spp. — Part 2: Enumeration method. Disponível em: ISO 11290-2:2017(en), Microbiology of the food chain — Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes and of Listeria spp. — Part 2: Enumeration method Acesso em: 16 jun 2023.

• ISO 11133:2014(en) – Microbiology of food, animal feed and water — Preparation, production, storage and performance testing of culture media Disponivel em: ISO 11133:2014(en), Microbiology of food, animal feed and water — Preparation, production, storage and performance testing of culture media Acesso em: 16 jun 2023.

• Carmen Paz Oplusti; Cassia Maria Zoccoli, Nina Reiko Tobouti; Maria Cristina Scheffer. (2010) Procedimentos Básicos em Microbiologia clínica – Editora Sarvier – 4° edição  

• ISO 7218, Microbiologia de alimentos e rações para animais – Requisitos gerais e orientações para exames microbiológicos ISO 11133, Microbiologia de alimentos, ração animal e água — Preparação, produção, armazenamento e testes de desempenho de meios de cultura. Disponivel em: ISO 7218:2007(en), Microbiology of food and animal feeding stuffs — General requirements and guidance for microbiological examinations Acesso em: 16 jun 2023.

• ISO 11290-1:2017 Microbiology of the food chain — Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes and of Listeria spp. — Part 1: Detection method. Disponivel em: ISO 11290-1:2017(en), Microbiology of the food chain — Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes and of Listeria spp. — Part 1: Detection method Acesso em: 16 jun 2023.